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急性降温对凡纳滨对虾血液生化指标及细胞免疫指标的影响
时间：2023-01-19 12:00:51 下载该word文档
急性降温对凡纳滨对虾血液生化指标及细胞免疫指标的影响
周萌;吴灶和;梁日深;顾娜
【摘要】为了解凡纳滨对虾(Litopenaeusvannamei对急性降温的耐受性,运用生化分析法和流式细胞术,研究了急性降温对凡纳滨对虾8项血液生化指标及6项细胞免疫指标的影响.结果显示,当水温从30℃降至16℃时(降温速率-4℃/h,凡纳滨对虾血糖含量显著下降,其他7项生化指标包括总蛋白、谷草转氨酶、谷丙转氨酶、胆固醇、甘油三酯、乳酸脱氢酶、肌酸激酶活性/含量均有不同程度的上升,其中总蛋白的上升达到显著水平.细胞免疫指标包括血细胞总数、活性氧含量、非特异性酯酶活性在降温后显著下降,细胞凋亡率显著上升,3类血细胞的组成比例则无显著变化.表明急性降温可能导致凡纳滨对虾血糖迅速消耗,蛋白质、脂肪的分解作用加强,细胞膜通透性的增加,引起组织损伤及相关代谢酶的外泄,并使细胞免疫功能受到损害;也说明凡纳滨对虾对急性降温非常敏感,会发生一系列生理功能的紊乱和免疫功能的下降.
【期刊名称】《广东农业科学》【年(卷,期】2015(042024【总页数】6页(P134-139
【关键词】凡纳滨对虾;急性降温;生化;细胞免疫【作者】周萌;吴灶和;梁日深;顾娜
【作者单位】仲恺农业工程学院动物科技学院,广东广州510225;仲恺农业工程学院动物科技学院,广东广州510225;仲恺农业工程学院动物科技学院,广东广州510225;仲恺农业工程学院动物科技学院,广东广州510225
【正文语种】中文【中图分类】S968.22
凡纳滨对虾（Litopenaeusvannamei）是我国养殖量最大的对虾品种，其生存的适温范围为15～32℃，温度低于12℃即停止摄食，温度低于10℃将可能死亡［1］。由于对低温的耐受性较差，其在环境温度突然下降（寒潮、降雨等）来临时，易发生大面积的病害或死亡，给养殖生产造成重大的损失。因此，掌握凡纳滨对虾在低温应激状态下的生理变化及物质代谢规律，通过营养补给和养殖管理，提高其对低温的耐受性，改善其生长性能，具有重要的现实意义。
由于研究对象和研究技术的限制等原因，以往对虾类低温胁迫的研究多数停留在生理生化、物质代谢和体液免疫功能等方面。作为无脊椎动物，血细胞在凡纳滨对虾的免疫过程中起着十分重要的作用，包括吞噬、包裹、储存和释放酚氧化酶原系统、细胞毒活性等。血细胞的种类和组成变化，可以反映机体对外界刺激的免疫应答［2］。血细胞产生的活性氧（ROS）和酯酶均是机体清除病原体、异物和坏死细胞的重要工具［3］，正常的细胞凋亡则是当虾类受到外来刺激时的一种生理性保护机制［4］。目前，对凡纳滨对虾低温应激下多项血细胞免疫指标的研究尚未见报道。本试验主要通过检测凡纳滨对虾在水温骤降后主要的血液生化指标变化，以及通过流式细胞术检测血细胞免疫指标变化，了解对虾在低温应激时的生理和免疫反应，为凡纳滨对虾的低温应激生理学提供理论依据。1材料与方法1.1试验材料
凡纳滨对虾购自广东顺德某对虾养殖场，购回后放入盐度为6‰的循环水中暂养两周后开始正式试验，期间每天饱食投喂商品饲料3次（9：00、16：00、22 ：
00）。暂养期间水温30（±1）℃，盐度6（±1）‰，溶氧10.0（±0.1）mg/L，氨氮0.007（±0.003）mg/L。1.2试验方法
1.2.1降温试验将60尾对虾（初重5.3±0.2g）随机置于2个泡沫箱（300L/个）中，每箱30尾虾，利用充气泵不间断充氧。其中一箱置于室温环境（30±1℃）中，另一箱置于恒温培养箱中，将水温从30℃降至16℃，降温速率-4℃/h。待水温稳定15min后取样，每箱各取12尾虾用于血液生化指标和细胞免疫指标的检测。
1.2.2血清样品的制备及生化指标的检测用1mL注射器从虾的围心腔抽取血淋巴，每尾虾的血淋巴收集置于2.5mL离心管中，4℃、3500r/min离心10min，取上清液（血清）。将同一个处理的血清合并，在日立7170自动生化测定仪上进行血清总蛋白、血糖、谷草转氨酶、谷丙转氨酶、胆固醇、甘油三酯、乳酸脱氢酶和肌酸激酶8项生理生化指标的分析，试剂盒购自长春汇力生物科技有限公司。1.2.3血细胞悬液的制备和血细胞总数的检测用1mL注射器吸取预冷的抗凝剂（葡萄糖20.5g/L，柠檬酸钠8g/L，氯化钠4.2g/L，pH7.5），然后从虾的围