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串联质谱

时间:2011-12-17 09:48:01    下载该word文档

串联质谱如何定量?

串联质谱定量时,是以后面产生的碎片峰(子离子)定量,但是这一子离子是由母离子在碰撞室产生的特征性碎片,所以用MRM定量灵敏度会比用SIM定量好很多。

建立方法的步骤是:用一定溶度的标准品溶液(1-10 ug/mLTune化合物的一级质谱条件,找到母离子的最佳质谱条件,然后对母离子进行打碎,优化碰撞能量,得到其特征性的子离子。最后利用该质谱条件和该母离子->子离子对进行定量。

APIABI如何区别?

Q-Tof中的Q是什么意思??

做样前-检查氮气,流动相,质谱仪的真空度,毛细管温度,…
1 最好不用直接进样(容易污染离子源)!
2 做联用时最好分流(a可以使用常规柱,b缩短分析时间,c 延长质量分析器寿命)
3 最好使用在线切换阀,降前每个样品的前后12分钟的流动相切入废液(避免样品中的盐进入质 谱,做Sequence时可以把平衡柱子的流动相切入废液)
4 开始联用前,直接运行质谱数分钟,可以先将温度(毛细管温度和离子源温度(APCI))加热到预设定值(如果是APCI源还可以避免将烧掉heater,很贵的,我烧掉过一个)
5 待机时将切换阀置于waste,避免刚开液相时将流动相打入离子源,
6 关机前毛细管的温度先降下来,稳定一段时间后再关闭电源,避免风扇停止转动后毛细
管外围的热量向里扩散,容易引起内部线路及电子元器件老化加速,
7 每天清理毛细管口外部,擦洗干净,每次停机时注意清洗Skimmer,用无尘擦拭纸,kimberly
那种,
8 如果用的是钢瓶而且天天做样的话,将两个钢瓶并联,当然,一月不做一次的话就算了,
9 做定量时注意离子源喷针的具体位置,否则标准曲线就不能用了,
10 不要不经过柱子分离进行定量分析,结果不可靠(竞争性抑制目标分子离子化)
11 如果是负离子检测的话,可以相流动相中加入少量异丙醇,
12 不好使用不挥发性盐,可以使用挥发性盐,但浓度不要超过20mmol/l
13 需要使用酸的情况下可以用甲酸,乙酸,三氟乙酸可以用,但能用甲酸或乙酸时就别用TFA

CIDCAD区别?

CID 英文是 collisioninduced dissociation 碰撞诱导解离。通常在真空接口处调节电压发生CID现象,一般是去除溶剂,如果电压增大,也会产生碎片离子。这是一级质谱的原理。CAD collision-activated dissociation 碰撞活化解离。 做二级质谱时,应该是发生在Q2处吧,选择的母离子的进入Q2 碰撞活化产生子离子,这个过程称为 CAD.

我们用的API3200CID指的是Q0里面的诱导碰撞的气体,CAD指的是Q3里面的诱导碰撞气体,也就是说,API里的CID&CAD都是指氮气。

氮气发生器该使用吗?

氮气发生器的工作原理是分离空气,电解膜的负极侧发生氧化反应,吃掉空气中的氧化性气体,在正极侧还原,空气流过电解池后就只剩下氮气和惰性气体,故国内发生器的纯度大多标有“相对含氧量”,氮气的纯度和空气流速,有效分解面的长度,电解电势的强弱都有关系,这种分离方法也决定了氮气的纯度不可能做的很高。 加入电解质的作用就是提高水的导电率,使电化学反应能顺利进行。发生器对色谱的影响有一点常常被忽略,就是发生器内的开关电源工作事会对电网电压造成一定的干扰(压缩机的启动和停止也会),所以色谱仪必须经过稳压电源供电,当然不用稳压电源的用户极少,但还是有,我遇见过。

质谱没有信号原因?

质谱没信号要顺藤摸瓜地找原因。一般先从离子源找起,然后看离子传输通道,再到质量分析器,接下来是离子探测器数据采集卡和软件。一般情况下不会有什么大问题。你检查一下各路的连线是否良好接触。skimmer的中文一般翻译成漏勺,它的主要作用是阁开两个不同真空度的空间,同时让离子通过。

如何更换机械泵油?

北京四方特种油品厂出产的高速真空泵油有比较好的口碑,价格合理。

质谱不出峰的故障排除
如果在检测样品什么峰都看不到,可从以下几方面考虑:
1 进样系统与离子源没连接或有漏液;
2 六通阀漏液
3 雾化气没开
4 喷雾电压没有
5 离子进入分析器的离子通道堵塞
6 喷雾毛细管堵塞

如何根据样品选择离子源?

看分子量的大小、极性
APCI适合小分子,极性小的化合物
ESI适合分析的分子量范围较大、分子要求带有一定极性。
一般都用ESI分析,如果极性实在太小,才想到用APCI

怎么测仪器的灵敏度?

检验仪器灵敏度的方法一般都是用利血平,
通过定量环直接进样,看信噪比

产生碰装室离子交互影响(Collision Cell Cross Talk)的原因及消除?

多通道扫描(MRM)时,如果两个离子扫描通道的碎片离子一样(或类似,相差1-2分子量单位),前一个离子通道扫描结束后,碰装室里的离子来不及清除,影响下一个离子通道反应的定量(如果色谱分离完全则无此影响)。
消除:
1        选择特异的子离子(特别是在用稳定同位素内标时)
2        增加离子通道扫描反应之间的时间间隔(100 ms300 ms
3        可设置额外的“无用的离子扫描通道(dummy MRM)”

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