单元过关检测(十一)

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1．(2019·河北唐山一模)有人认为，鲜榨果汁比盒装或瓶装的果汁更新鲜健康。食品监督人员发现鲜榨果汁若不能做到无菌生产，更容易滋生细菌。研究过程如下，请分析并回答下列问题：

(1)纯化培养细菌的方法：平板划线法可以观察菌落特征，对混合菌进行分离，但不能________；使用稀释涂布平板法，在稀释度足够高时，一个菌落代表________。

(2)对细菌计数时往往会产生实验误差，稀释涂布平板法计数的值比实际值________，原因是____________________________________；显微计数法计数的结果比实际值________，原因是________________________________________________________________________。

(3)接种结束后，将一个未接种的培养基和一个接种的培养基放在一起培养的目的是________，未接种的培养基表面是否有菌落生长很关键。如果有菌落生长，说明________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

解析：(1)平板划线法可以观察菌落特征，对混合菌进行分离，但不能计数；使用稀释涂布平板法，在稀释度足够高时，聚集在一起的微生物将分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落，即一个菌落代表单个细胞。

(2)用稀释涂布平板法对细菌进行计数时，当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，所以统计的菌落往往比活菌的实际数目偏小；用显微计数法计数时，由于显微镜下无法区分细胞的死活，计数结果包含死细胞，所以计数的结果会比实际值偏大。

(3)接种结束后，将一个未接种的培养基和一个接种的培养基放在一起培养的目的是作对照，未接种的培养基表面是否有菌落生长很关键。如果有菌落生长，则说明培养基灭菌不彻底(或培养基被污染了或需要重新制备)。

答案：(1)计数　单个细胞

(2)偏小　当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落　偏大　显微镜下无法区分细胞的死活，计数结果包含死细胞

(3)对照　培养基灭菌不彻底(或培养基被污染了或需要重新制备)

2．(2019·四川达州诊断)为调查某地土质状况，科研小组对该地土壤中分解尿素的细菌进行了分离和纯化培养。请回答下列问题：

(1)分解尿素的细菌能分解尿素，而其他微生物不能，其根本原因是前者具有____________________________。为筛选出分解尿素的细菌，在配制培养基时应选择以________作为唯一氮源。分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO2作为碳源，但可用葡萄糖作为碳源，由此推测分解尿素的细菌是________(填“自养”或“异养”)型生物。

(2)该研究小组将10克土样进行梯度稀释，在某个稀释度下涂布接种了3个平板(接种量均为0.1 mL)，经适宜培养后，3个平板均没出现菌落，分析可能的原因是____________________________。分析原因后，科研小组用先前制作的未使用的平板重新涂布接种完成实验，在另外某个稀释度下涂布接种的3个平板，经适宜培养后均存在多种不同特征的菌落，推测最可能的原因是______________________________________________

________________________________________________________________________。

(3)科研小组从同一平板中挑选出A、B、C三种菌落进行梯度稀释并分别涂布接种在分解尿素的细菌的选择培养基上，经适宜培养后，均能检测到A、B菌落却始终检测不到C种菌落。

①由此可得出的结论是________________________________________________。

②推测C种细菌与A、B种细菌在同一个平板上能生长繁殖的可能原因是________________________________________________________________________。

解析：(1)根据题意分析可知，分解尿素的细菌之所以能分解尿素的根本原因是具有控制合成脲酶的基因。为筛选出分解尿素的细菌，在配制培养基时应选择以尿素作为唯一氮源，即能分解利用尿素的分解菌能正常生长繁殖，不能利用尿素的分解菌被淘汰。分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO2作为碳源，但可用葡萄糖作为碳源，由此得出分解尿素的细菌是异养型生物。(2)利用稀释涂布平板法进行接种培养后，若3个平板均没出现菌落，可能的原因是稀释度过高，导致涂布的菌液中不含分解尿素的分解菌或涂布器灼烧后没冷却，导致接种液中尿素分解菌被杀死。若在某个稀释度下涂布接种的3个平板经适宜培养后均存在多种不同特征的菌落，说明接种用的土样中存在多种尿素分解菌，而不同分解菌形成的菌落特征不同。(3)结合题意分析，A、B、C三种菌落能混合生长在筛选尿素分解菌的选择培养基中，但C菌落却不能单独生长在该选择培养基中，说明A、B菌落能分解利用尿素，但C菌落不能单独分解利用尿素，很可能是C种菌落的细菌可从A或B菌落的代谢产物中获得氮源。

答案：(1)控制脲酶合成的基因　尿素　异养

(2)稀释度过高(或涂布器灼烧后没冷却)　该土样中有多种细菌能分解尿素

(3)①C种菌落的细菌不能分解尿素　②C种菌落的细菌可从A或B菌落的代谢产物中获得氮源

3．(2019·河北石家庄一中模拟)近年来，《舌尖上的中国》引发全民关注美食的热潮，其中不乏利用微生物发酵制作的美食，如素有“东方奶酪”之称的“石宝寨牌”忠州豆腐乳、中国泡菜领导品牌“吉香居”等。请回答下列有关问题：

(1)“石宝寨牌”忠州豆腐乳前期发酵是在严格的无菌条件下，接入优良毛霉菌种，这样可以________________________，温度应控制在______，并保持一定的________________________________________________________________________。

然后向长满毛霉的豆腐块加盐，其作用是______________________，同时，盐还能________________，避免豆腐块腐败变质。后期加入食盐、香料粉、乌杨白酒密闭发酵6个月，乌杨白酒含量一般控制在12%左右的原因是____________________________________

________________________________________________________________________。

(2)制作“吉香居”泡菜时，起主要作用的微生物是_____________________________。

为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的目的是________________________________________________________________________。

在发酵初期，很多杂菌会大量繁殖，其中导致泡菜水的表面长白膜的微生物是________。从开始制作到泡菜品质最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸，这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是_____________________________________________________。

解析：(1)传统腐乳制作中所需的毛霉来自空气中的毛霉孢子，而现代的腐乳生产是将优良的毛霉菌种接种在豆腐上，这样可以避免其他菌种的污染，保证产品的质量。制作腐乳时温度应控制在15～18 ℃，并保持一定的湿度。腐乳制作过程中，加盐可以析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬，同时，盐能抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质。酒含量要控制在12%左右，因为酒精含量过高，会使腐乳成熟的时间延长，酒精含量过低，不能抑制微生物的生长，造成杂菌污染。(2)制作泡菜时，起主要作用的微生物是乳酸菌。在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液的目的是增加乳酸菌含量。在发酵初期，酵母菌(或产膜酵母)可使泡菜水的表面形成白膜，开始制作后，泡菜液逐渐变酸，这段时间内泡菜坛中乳酸菌数量增加，杂菌数量减少。

答案：(1)避免其他菌种的污染，保证产品的质量

15～18 ℃　湿度　析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬　抑制微生物的生长　酒精含量过高会延长腐乳成熟的时间，含量过低，则不能抑制杂菌生长

(2)乳酸菌　增加乳酸菌含量　酵母菌(或产膜酵母)　乳酸菌数量增加，杂菌数量减少

4．(2019·河南百校联盟联考)请回答下列生物技术的有关问题：

(1)制作果醋和葡萄酒使用的微生物在结构上有所不同，主要是前者__________________________。各地制作腐乳的原料和菌种相同，但风味迥异，主要是通过控制______________来实现的。

(2)从土壤中分离筛选能高效分解尿素的细菌，首先要将选取的一定量的土壤溶解在无菌水中，进行________后，才能够接种到培养基表面上，接种时所用的接种工具是__________。

(3)生姜精油是传统的保健良方，调和在洗发露中，可去头风、止头痛，提取生姜精油的流程如下：植物体→生姜→油水混合物→初级精油→除水、过滤→生姜精油。提取生姜精油时，采用__________获得油水混合物，然后在其中加入__________试剂，分层后可获得初级精油，再加入__________试剂，可进一步除水获得生姜精油。

解析：(1)果醋制作过程中的发酵菌种是醋酸菌，是原核生物，无细胞核，制作葡萄糖过程中使用的微生物是酵母菌，是真核生物，二者在结构上的主要区别是前者无成形的细胞核或无核膜；各地制作腐乳的原料和菌种相同，但风味迥异，主要是通过控制发酵的条件来实现的。

(2)从土壤中分离筛选能高效分解尿素的细菌时，为防止土壤浸出液浓度过高，不能获得单菌落，首先要将选取的一定量的土壤溶解在无菌水中，进行梯度稀释后，才能够接种到培养基表面上；接种时所用的接种工具是涂布器。

(3)水蒸气蒸馏法是植物精油提取的常用方法。提取生姜精油时，采用水蒸气蒸馏法获得油水混合物，然后在其中加入氯化钠试剂，增加盐的浓度，就会出现明显的分层，分层后可获得初级精油，再加入无水硫酸钠吸水，放置过夜，再过滤除去固体硫酸钠就可以得到生姜精油。

答案：(1)无成形的细胞核或无核膜　发酵的条件

(2)梯度稀释　涂布器

(3)水蒸气蒸馏法　氯化钠　无水硫酸钠

5．(2019·四川绵阳诊断)提取植物有效成分时，不同的有机物具有不同的理化特性，所采用的提取方法也不同。分析下列关于提取植物有效成分的实验，回答相关问题：

(1)薰衣草精油是由薰衣草提炼而成。可以清热解毒，清洁皮肤。下面是某同学设计的提取薰衣草精油的实验流程：

图中的A表示__________________过程，在此过程中，影响薰衣草精油提取量的主要因素有________________，B过程的目的是________________________。

(2)提取柠檬精油时，常采用__________法而不用上述提取薰衣草精油的方法，原因是____________________________________________________。

(3)胡萝卜素化学性质比较稳定，易溶于有机溶剂，可采用萃取法提取。萃取时选择的有机溶剂应具有的特点是____________________________________(答出三点即可)，萃取装置要在加热瓶口安装回流冷凝装置，其目的是________________________________。

解析：(1)分析“提取薰衣草精油的实验流程”图可知：A表示水蒸气蒸馏过程，在此过程中，影响薰衣草精油提取量的主要因素有蒸馏的温度和时间。B过程是过滤，其目的是除去无水硫酸钠。(2)由于柠檬精油的有效成分在水中蒸馏过程中会发生部分水解，同时水中蒸馏会导致原料焦糊问题，因此一般采用压榨法提取柠檬精油。(3)用萃取法提取胡萝卜素时，所选用的萃取剂应具有较高的沸点、能够充分溶解胡萝卜素且不与水混溶等特点。因萃取剂为有机溶剂，易燃、易挥发，所以萃取装置要在加热瓶口安装回流冷凝装置。

答案：(1)水蒸气蒸馏　蒸馏的温度和时间　除去无水硫酸钠　(2)压榨　水中蒸馏会导致原料焦糊和有效成分水解等问题　(3)具有较高的沸点、能够充分溶解胡萝卜素、不与水混溶　防止加热时有机溶剂挥发