《中医基础理论实验指导》，是利用现代科学技术手段，印证中医的基本概念和基本理论的一门实验性课程。它是《中医基础理论》教学的重要组成部分。开展中医基础理论的实验教学，是中医教学改革的一项重要措施，它有助于加深学生的探索精神，巩固专业思想，培养和训练学生具有现代中医人才的科研认识和动手能力。 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　中医基础理论教研室 （一）《中基》实验基本技能训练 （五）肾主小便实验（示教） （二）精神意识思维对汗液分泌的影响（示教） （六）元气充沛与否对小白鼠耐氧时间的影响 （三）肺吸清呼浊与外合皮毛实验 （七）寒热对血液运行的影响 （四）肝主疏泄对胆汁分泌的影响 （八）寒邪与热邪致病的实验观察 　　　　　　　　　　　　　（一）《中基》实验基本技能训练 【目的】 通过本实验，学习和掌握动物分组、标记和常用的几种给药方法等基本技能．以利于进行各项中医基础理论数字实验． 【实验用具】 １ｍl注射器、生理盐水、注射针头各１枚：４＃ ６＃、 １８~２２ｇ小白鼠３只 【实验方法】 1、小白鼠的捉持及各种给药途径： （１）捉持法 先用右手抓住鼠尾捉起，放在实验台上，在其向前爬行时用左手的拇指和食指抓住小白鼠两耳和头颈部皮肤，然后将鼠体置于左手心中，捉后肢拉直，用左手的无名指及小指按住尾巴和后肢，前肢可用中指固定，这样即可作注射或其它操作，小白鼠一般不会咬人，但动作要轻而迅速。 （２）灌胃 以左手捉持小鼠，使腹部朝上，颈部拉直，右手持配有灌胃的注射器自口角插入口腔，再从舌背沿咽后壁向下进入食道胃，如手法正确，灌胃器很容易进入，若遇阻力或灌时不通畅则表示针头未插入胃内，必须拔出后按上述方法重新操作。此种灌注方法要点在于：动物要固定好，头部和颈部保持正直，插入方向一定要沿着口角进入，再顺着食管而入胃内，决不可用力猛插，以免刺破食道或误入气管，注入肺内，造成死亡。 （３）腹腔注射 左手抓住小白鼠的方法同上，右手持配有注射针头的注射器取４５角度将针头向下腹部向头端刺入腹腔，抽注射器．如无血和尿液，则可知针头未刺入肝、膀胱等脏器，即可进行注射，进行腹腔注射时应注意针头刺入都不宜太近上腹部或太深，以免刺破内脏，针头与腹腔的角度不宜太小，否则容易刺入皮下。 （４）尾静脉注射 注射前一个同学固定小鼠，露出尾部，用７０％酒精涂擦尾巴，使尾静脉充血，即可见尾部有二条静 脉，适用４号针头将针头从静脉末稍处插入血管，并以手指将针头与鼠尾固定之后推进药液，如推注时有阻力，且局部变白，表明针头未刺入静脉，应重新穿，穿刺血管时宜从尾端开始，以便失败后可在穿刺点的上部重复进行，尾静脉注射常用左右两侧的两根静脉，因其位置较固定，容易注入，背侧的一根尾静脉易移动，腹侧一根血管是动脉，此处不能注射。 ２、大白鼠的捉持和各种给药途径 （１）捉持法 大白鼠的牙齿很尖锐，不要突然袭击式地去抓它，取用时应轻轻抓住尾巴后提起，如要作腹腔注射或灌胃等操作时，实验者应带上棉纱手套，右手轻轻抓住它的尾巴向后拉，左手抓紧鼠两耳和头颈部皮肤，并将鼠固定在左手中，右手即可进行操作，若进行尾静脉注射，则可将其置于大白鼠固定笼内。 （２）灌胃 同小白鼠灌胃法。 （３）腹腔注射 同小白鼠腹腔注射。 （４）尾静脉注射 同小白鼠注射。 【实验动物的处死法】 １、静脉或心内直接注入大量空气造成空气栓塞。 ２、从插管的动脉放血。 ３、阻塞气管插管造成窒息死。 ４、对小白鼠可采用颈椎脱位法，使延脑与脊髓断离而死亡。 ５、用钝器敲打动物后脑急死。 　　　　　　　　　　　（二） 神意识思维对汗液分泌的影响（示教） 【实验目的】 通过观察精神意识思维活动对皮肤电流的影响，从而启发和加深精神意思维活动与汗液之间关系的认识。 【实验对象】 人 【实验用品】 Ⅳ导生理记录仪一台、电极板三块、电极钉一枚、实验床一台、７５％酒精、生理盐水、药棉适量、尼龙绷带三条、示波器一台、生光刺激仪一台。 【实验方法】 1、受试者平卧于实验床上，暴露左前臂及右小腿。 2、用７５％酒精擦净受试者左手劳宫、内关穴，右小腿内侧皮肤。 3、联接电极：引导电极用一红色线接的电极钉直接置于劳宫穴；参考电极用另一红色线接的电极置于内关穴；人体接零点为一黑色导线电极置于右小腿内侧（后两者与皮肤接触处之间隔以薄层生理盐水药棉）外以绷带固定，联接好示波器。 4、受试者处于安静状态，不考虑任何问题，肢体不能动弹。 5、开启Ⅳ导生理记录仪开关，先在示波器上观察，待波形稳定后，依次按下"准备"与"记录"开关，先描记受试者安静状态下的。 6、间断地给被试者以若干个刺激（让其快速思考问题，或给以声光刺激）观察其皮肤电的波形变化，并记录之。 【注意事项】 1、不要任意多调生理记录仪的旋钮，以防损坏贵重仪器。 2、必须保持电极板与皮肤的良好接触。 3、被试者必须保持肢体的绝对静止状 态，不能任意动作，否 则将影响皮肤电波形。 4、打开生理记录仪后，须先在示波器上观察，待波形稳定后 才能打开描笔记录，以防损坏描笔。 5、若生理记录仪出现交流干扰，及时请指导老师排除。 【思考题】 汗液是一种能够导电的电介质溶液，因此，汗液分泌量的增加能够降低皮肤电阻而提高皮肤电流。本实验表明，精神意识思维活动越强，汗液的分泌也越多、皮肤电流越大。通过本实验你对"心"与汗液之间的关系是怎样认识的？ 　　　　　　　　　　　（三）肺吸清呼浊与外合皮毛实验 【实验目的】 1、通过实验，理解"肺主呼吸之气"具有"吸清呼浊"的生理功能。 2、通过动物实验，从物种进化的角度来体会"肺外合皮毛"的理论。 －、"肺吸清呼浊"实验： 【实验用品】 蜡烛2只、火柴1盒、５００ｍl烧杯2只、输液胶管1根、秒表1只。 【实验方法】 点燃两只蜡烛，分别用两只烧杯罩上，再用胶管插入其中的一只烧杯内，并立即向杯内徐徐吹入呼出气，同时记录从开始吹气起到两支蜡烛熄灭的时间。 二、"肺外合皮毛"实验 【实验对象】 一只蛙或蟾蜍 【实验用具】 小铁笼一个或5００ｍ１烧杯１只、石蜡油、棉签。 【实验方法】 １、取蛙一只，置小铁丝笼内观察其正常呼吸方法、动度并记录呼吸次数１分钟． ２、以棉签粘取石蜡油，涂蛙的全身后，观察呼吸方法、动度变化以及呼吸次数１分钟。 【讨论结果】 １、两只玻璃罩内蜡烛熄灭的时间是否一样？如不一样，那么哪一个玻璃罩内的蜡烛先熄灭？为什么？ ２、涂石蜡油后蛙的呼吸方式及呼吸次数１分钟内动度有无变化？为什么？ 联系有关物种变化的知识，进一步讨论实验所出现的变化。 【思考题】 １、人体的吸清呼浊功能是通过哪一脏器来实现的，及生理机制是什么？临床有何意义？ ２、肺外合皮毛对临床实践有何指导意义？ 　　　　　　　　　　　（四）肝主疏泄对胆汁分泌的影响 【实验目的】 给大白鼠灌注疏肝药香附等，以观察比较给药前后大白鼠胆汁分泌的差异，以加深对中医学"肝主疏泄"而利胆理论的理解。 这是具有疏肝作用的药物香附，意在观察共对胆汗分泌的影响。 【实验材抖】 ２５％乌拉坦溶液、生理盐水、1：１香附水煎液 手术器械∶手术刀（柄）、镊子（小）、止血钳２把、注射器 （１ｍｍ １付、５ｍl １付）、针头（５号１枚８号１枚）、 直径１ｍｍ塑料管２只、动物固定板１块、天平１台、试管２只、 ３００ｇ雄性大白鼠２只 【实验方法】 大组示教，（有条件可让同学自己动手） １、取雄性大白 鼠２只，称重后分别取２5％乌拉坦进行腹腔麻醉（２ｍl／ｋｇ体重）． ２、将动物从仰卧位分别固定于动物固定板上，在剑突下剖腹作正中切口，长约２－３ｃｍ，沿腹白线打开腹腔、以无齿镊提出胃，沿胃拉出十二指肠，再到胆总管。稍作分离后，在胆管中段用眼科剪刀，剪一小口，然后插入细塑料管引流胆汁、待胆汁。 待胆汁流出稳定后，以刻度试管收集１小时胆汁以1ｍl针管抽出，记录流出量。 ３、换一试管，一鼠在十二指肠注射舒肝复方药香附（１ｍl／１００ｇ体重）另一鼠注入等量生理盐水，作为对照，然后各再收集１小时胆汁。 ４、将同一鼠处理前后胆汁流出量作比较、两鼠之间胆汁流出量作比较，并讨论． 【注意事项】 １、麻醉适度、勿过浅过深。 ２、尽量减少手术出血量。 ３、牵拉胃肠要轻，注意保护内脏器官。 ４、动物注意保温（天冷尤为重要）。 　　　　　　　　　　　　　　　（五）肾主小便 【实验目的】 肾为水脏，主全身水液代谢。通过现察动物尿量的变化，来理解肾主小便的功能。 【实验对象】 兔或狗 【实验用品】 兔固定台、手术器材、塑料管、记滴器、生理盐水．注射器、针头、25％葡萄糖、３％戊巴比妥钠、ｌ00％五苓散煎剂。 【实验方法】 1、按1ｍl／ｋｇ的计量由耳缘静脉注入３％戊巴比妥钠，待麻醉后，将动物仰卧固定。 2、在下腹部近心耳联合上缘，作正中切口，长４~６ｃｍ暴露膀胱，排空尿液后将膀胱轻轻拉出，在膀胱三角找到输尿管，在输尿管进行膀胱端结扎，向肾端剪一小口，然后插入充满生理盐水的输尿管套管。 3、切开颈部正中皮肤．于皮下找到颈总静脉，插入输液管。 4、静脉滴注生理盐水５０~１００ｍl，并记录量作基础对照。 5、经颈总静脉输入药物20ｍl，15~20分钟后记录尿量。 6、比较４、5两项结果。 【讨论结果】 通过本实验对尿量变比的观察．分析输入中药煎剂后尿量变化，从中医脏腑生理功能出发，讨论尿液的产生与排泄。 【思考题】 肾是如何主管小便的产生与排泄的。 　　　　　　　　　　　　　（六）元气充沛与否对小自鼠耐氧时间的影响 【实验目的】 观察元气旺盛或不旺盛的小白鼠在缺氧情况下生存时间的差异，以了解元气在生命活动过程中的重要作用。 【实验材料】 125ml大口瓶１０只，125ml大口瓶塞１０只，注射器２付（1ml）、注射针头６号 ２只、纳石灰、人参水煎液、生理盐水、１８~２２ｇ小白鼠１０只。 【实验方法】 １、将人参１∶１浓度水煎至所需量。 ２、称纳石灰０.５ｇ1０份，置于广口瓶中。 ３、取１８~２２ｇ雄性小白鼠１０只，分成二组，一组为实验组、一组为对照组，并称好重量，作好标记。 ４、将实验组的小白鼠腹腔注射入参水煎液（以０．０８ｍl／ｌ０ｇ的剂量）；对照组注射等量的生理盐水（均以腹腔注射）。 ５、待用药半小时后，将小白鼠放在广口瓶内，迅速用橡皮塞塞紧瓶口，同时按下秒表。 ６、仔细观察小白鼠窒息致死的时间，并记录备案。 【注意事项】 １、盖紧盖子。 ２、药物注射后，必须要到３０分钟后方可置于瓶内。 ３、药物注射必须在腹腔内进行。必须在腹腔内浅刺，不能刺入肝脏等脏器，以防损伤内脏而致死。 　　　　　　　　　　　　　　　（七）寒热对血液运行的影响 【实验目的】 观察不同温度下，实验动物肠系膜微循环的变化，进一步加深对"寒则血滞"、"热则血行"的理论的认识． 【实验对象】 青蛙或蟾蜍 【实验用品】 有孔蛙板１只、剪刀1把、针1根、镊子1杷、固定线4根、锥子1把、光学显微镜1架、生理盐水（热、冷）、大头针若千． 【实验方法】 １、用破坏蟾蜍脑和脊髓的方法处死动物，然后将动物用绳子固定于蛙板上，从侧腹部剪开蟾蜍腹部，牵出肠系膜。并用大头针固定于蛙板孔上，置显微镜下观察。 ２、观察方法及项目∶首先找到一根较容易分辨的微血管，仔细观察这根血管的血流速、血管形态，并记录室温，描绘然后滴冷盐水，观察血流速的变化。 ３、记录并讨论上结果。 【讨论结果】 通过本实验，说明寒与热刺激对血流运行有何影响，其机制是什么？ 【思考题】 寒与热对血液运行是怎样影响的？用实验结果说明寒与热的性质与致病特点。 附： 微血管血流速七级分类法 1、线流：血流快，呈光滑的索条状，毫无颗粒，形如带。 2、线粒流：血流呈光滑的索条状，稍有颗粒感形加绸带。 3、粒线流：血流较快，连续成线，有明显颗拉感，形如带。 4、粒流：血流较慢，轴流，缘流混杂如泥沙流，如麻带。 5、粒缓流：血流呈泥沙流，连续缓慢流动。 6、粒摆流：血流呈泥沙流，前后摆动似能向前流活动。 7、停滞：血滞不动． 联系有关物种变化的知识，进一步讨论实验所出现的变化。 　　　　　　　　　　　　（八）寒邪与热邪致病的实验观察 【实验目的】 通过寒邪、热邪实验动物模型的制作，观察寒邪、热邪致病后机体出现的症状及其特点，并分析其病理变化。 【实验准备】 雄性小鼠4只、食盐、冰快、酒精、鼠笼、鼠筒、台秤、广口瓶（带有两孔的胶塞）、500ml烧杯、乳钵、温度计（-20~100℃）、酒精灯、三角支架、石 棉网、火柴、体温计、镊子、白瓷板。 【实验方法和步骤】 1、 热邪致病 （1） 称取体重相近的雄性小鼠2只，测试体温后分别放入两个广口瓶中，一广口瓶中小鼠为实验用，另一广口瓶中小鼠为对照观察。 （2） 将存有150ml常水的大烧杯置于三角支架上。 （3） 将实验用的广口瓶置于上述烧杯中，然后用酒精灯慢火加温，控制火焰，使瓶中温度保持在35~40℃之间，随着温度的逐渐升高，观察小鼠有何异常表现，待小鼠出现热汗、四肢无力、惊厥等症状时，从广口瓶中取出，再测体温，观察精神、粘膜色彩、被毛、汗液、四肢等，并与对照组进行比较。 2、 寒邪致病 （1） 同热邪致病第一步。 （2） 将食盐与冰快按1：2重量比混匀放入500ml烧杯中，随着环境温度的逐渐降低，观察小鼠有何异常表现，待小鼠表现出末梢皮肤粘膜变得苍白、皮紧毛乍、肢体僵硬时，从广口瓶中取出，再测体温，放于白瓷板上观察行走步态等，并与对照鼠进行比较。 【观察结果】 热邪和寒邪致病分别参考下表记录。 组　　别 精神 粘膜色彩 被毛 汗液 四肢 体温 实验鼠 实验前 实验后 对照鼠 实验前 实验后 【分析讨论】 1、 热邪致病有哪些症状，本实验能看到什么？为什么会出现这些症状？ 2、 本实验寒邪致病动物表现哪些症状？是属于外寒还是内寒，为什么？