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固相法ABO正定型、RHD血型检测卡的使用心得

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2015年7月 第21卷 No.3344 固相法ABO正定型、RHD血型检测卡的使用心得冯丽辉 (黑龙江省中医医院南岗分院 黑龙江哈尔滨 150000)【中图分类号】R446.5【文献标识码】B【文章编号】1006-6586(2015)07-0344-01  早期对于血型的定义是指红细胞表面抗原的差异,现知血小板和白细胞表面抗原也存在差异,因此,血型是指抗原抗体系统的遗传特征。血型检测的应用主要用于输血、器官移植、骨髓移植、法医鉴定、考古研究等。为了保障输血安全,《输血技术规范》中明确规定要检查受血者和供血者ABO血型正反定型及患者RHD血型[1]。因此,血型检测结果的准确与否事关生命,至关重要。血型系统分为ABO血型系统和RH血型系统。两种血型系统的鉴定方法主要有生理盐水凝集法和凝胶微柱法,前者又有玻片法和试管法之分。玻片法虽操作简单、方便快捷,但如遇被检者血清抗体效价低,则不易引起红细胞凝集,因此不适于反向定型。试管法是传统经典的ABO、RhD血型鉴定的金标准方法,其结果准确可靠,但与微柱凝胶法相比,敏感性较差,操作难以标准化、自动化、检测结果不易保存,而微柱凝胶法用于ABO、RhD血型鉴定易于自动化、标准化、结果准确可靠,特异性强等优点被许多大医院所采用。微柱凝胶法操作简便、快速、省时、省力,易于观察结果,并可以长时间保存血型鉴定样本(保存7d以上),有利于事后复查。在微柱凝胶法操作过程中,当红细胞浓度过低或过高且离心不彻底、血清中含纤维蛋白出现细胞“凝块”、细菌污染时,可能导致假阴性或假阳性的结果。微柱凝胶法试剂成本高,不适于基层医院的推广使用。随着自动化的发展,如今血型鉴定可以使用全自动血型检测系统,它和梯形微孔反应板分析判读软件结合到一起,运用模糊数字的方法进行分析判断,得出血型鉴定结果[2]。梯形微孔板的操作只有加样、混匀、静置、读板4个步骤,抗原抗体的结合、凝集与非凝集反应的区分在静置中一步完成,易于标准化。且灵敏度、准确性、不规则抗体的检出率及抗脂血干扰能力都优于U型微板法,操作简便。另外一个特点是试剂用量少,节约成本:抗A、B试剂用量仅为1/7,抗D用量仅为1/20。不需要特别的试剂或者是配套试剂[3]。由于该仪器灵敏度比较高,影响因素有以下几个方面:(1)对待检标本要求比较高,标本必须是抗凝血,且抗凝效果要好,否则容易出现成堆的细胞,引起假阳性反应图像。(2)对试剂的配制要求比较高,必须严格按照所需的浓度配置,否则结果比色不理想,或者出现正反型血不对应的反应格局。(3)该方法对梯度板的清洁要求较高,每次使用完梯度板后一定要及时清洗干净,不能有残余的蛋白,否则很容易出现假阳性。(4)由于反应是通过自然沉降来完成,静置一定要水平,否则影响最终结果,且反应过程中不能震动,所需的时间比较长,需要1h,只适合批量常规检测,不适合紧急血型检测[4]。现有一种测定血型的新方法—固项免疫吸附法,此法将固项免疫吸附测定技术和凝集反应技术相结合,是一项高特异性、高敏感性、简便易行的检测技术。它在国外已得到广泛应用,而国内报道甚少[5]。固项免疫吸附法测定血型是根据抗原抗体免疫吸附原理,将抗-A、-B、-D单克隆抗体分别固定于多孔固相载体上,当待测标本中的红细胞与固相抗体发生免疫结合反应,红细胞即被截留在载体上,显示红色,为阳性反应;如无抗原抗体免疫反应,红细胞则不能被截留,显示无色,为阴性反应。经临床证实,这种检测方法检测的血型结果与微柱凝胶法、试管法的结果一致,符合率达100%。固相法试剂具有以下优点:①试剂保存方便,传统的试剂需要2-8℃保存,该试剂可常温保存;②便于携带,污染小,克服了液相试剂容易泼溅的缺点,操作现场能够保持清洁;③操作简单快捷,无需借助仪器,实验不需要动力及设备保障,非专业人员就可实施,2min之内即可判读结果;④稳定性好,效期长达2年;⑤固相载体上易于粘贴条形码,可以避免出错;⑥检测结果易于保存,可反复判读[6]。由于这种固相法血型定型试剂具备操作简便、结果易观察、常规条件储存、不需要额外试剂、无需动力及设备保障的优点,非专业人员经过简单培训后即可操作,因此特别适合用于突发事件条件下快速血型鉴定,为应急血液保障提供了技术方法保证。本试剂的不足之处在于只检测ABO和RhD血型的抗原,只有正定型结果,不能发现正反定型不符的疑难血型。在常规应用时还需结合反定型综合判断血型,以免发生由于血型不合造成的溶血性输血反应[7]。另外,将储存于4℃的标本取出并立即测试时,-40℃条件下红细胞容易被冻住,冲洗液不能将血细胞冲掉,从而对结果造成干扰,标本必须在室温平衡10min后测试[8]。在低温条件下,ABO血型与RhD血型的反应时间均较长。这是由于抗原抗体反应受温度的影响较大所致,因此建议在低温条件下,应延长观察时间。2013年,《临床误诊误治》杂志已经刊登了栾建凤,邵小宝等人研制的ABO反定型免疫胶体金试剂,如果将其和固相法ABO正定型、RHD血型检测卡联合起来,制备成一张血型检测卡将更利于临床血型检测的结果正确性,期待这种固项血型检测卡的快速问世。参考文献[1] 中华人民共和国卫生部.临床输血技术规范[P].2000年.[2] TheNationalCommitteeforClinicalLaboratoryStandardsMethodComparisonandBiasEstinationUsingPatientSampleApprovedGuideline[S].NCCLS-EP9-A,1995.[3] 马贵明,费荣,柯苑,等.Poseidon数字血型仪在ABO正反定型、RH(D)规则抗体筛选中的应用[J].临床血液学杂志,2007,4(2):23.[4] 危燕芬,朱仕清.全自动血型检测系统在血型检测中的应用.中国当代医药,2012,5(19):85-87.[5] DesmontsG,NaotY,JackSR.Immunoglobulinmimmunosorbentagglutinationassayfordiagnosisofinfectiousdiseases:diagnosisofacutecongenitalandacquiredToxoplas mainfection[J],JClinMidrobiol,1981,14(5):486-491.[6] 侯涛,朱培元等,固相法血型定型试剂的研制及准确性评估.临床误诊误治,2013,26(10):96-98.[7] 彭道波,兰炯采,王梁平,等.用微柱凝胶试验进行交叉配血[J].中国输血杂志,2001,14(4):232.[8] 侯涛,范许洲,邵小宝,等.固相法血型定型试剂在极端气候条件下使用的可行性评估[J].中国输血杂志,2011,24(12):1019-1021.引导骨再生术对美学区种植体周软组织的影响金宪哲 (辽宁省法库县金顺口腔诊所 辽宁省法库 110400)【中图分类号】R782.2【文献标识码】B【文章编号】1006-6586(2015)07-0344-01【摘要】 目的:通过对患者应用引导骨再生术来研究对在美学区周围的种植体的周围相关的软组织损害的有关影响程度。方法:收集2013年1月到2014年9月我院接受并进行治疗的50名应用引导骨再生术来研究对在美学区周围的种植体的周围相关的软组织损害的的患者,使用随机分配的统计学方法,可以化为实验组和对照组。试验组应用引导骨再生术方法对患者进行治疗,对照组应用普通治疗方法进行对比治疗。分别在手术完成后的第一个月里,然后是永久修复体修筑完成之后和功能恢复之后的第一年,分别记作t1,t2,t3.。结果:以复查三次的的复查结果为依据探究周围软组织的变化程度,研究后发现,治疗组t1,t2,t3分别为1.99mm,2.11mm,2.30mm,对照组的结果为t1,t2,t3分别为1.99mm,2.11mm,2.30mm,经统计学分析后发现龈的乳头的治疗指数不具有统计学意义。结论:通过对患者应用引导骨再生术来发现可以影响在美学区周围的种植体的周围相关的软组织损害。【关键词】 引导骨再生术;美学区;软组织  随着今年来的人们的生活治疗不断提高,直接导致使人们牙龈结构发生了较大的改变,为了使牙更加美观,人们对美学区的种牙的需求量越来越大。经过今年的研究发现由于患者的实际情况不同比如骨密度不同,软组织的丰富程度等原因引导骨再生术的难度也不断提高。但是从另一方面看,引导骨再生术确实是美学区种植体周软组织的一个里程碑,他有效的解决了软组织周围的骨缺损的情况,从而大大的提高了其有效率与治愈率。本针对针对引导骨再生术进行研究,现将结果公布如下。1资料与方法1.1病例资料:收集2013年1月到2014年9月我院接受并进行治疗的50名应用引导骨再生术来研究对在美学区周围的种植体的周围相关的软组织损害的的患者,使用随机分配的统计学方法,可以化为实验组和对照组。1.2外科和临床修复程序:试验组首先应用导板确定种子的种植的方向。随后进行口腔及周围组织的常规消毒。随后手术开始,首先分离种植体周围软组织同时测定骨密度,其次埋置种植体,最后缝合创面,最后进行术后护理促进创面的愈合和种植体的发育。对照组应用普通手术方法进行对比治疗,最后观察治疗效果。1.3检查和记录:分别在手术完成后的第一个月里,然后是永久修复体修筑完成之后和功能恢复之后的第一年,分别记作t1,t2,t3.。并实时记录其变化情况,相关的评价依据我国最新公布的牙龈的检查标准进行评价。1.4统计学分析在此次分析中,病人的治疗数据均使用SPSS17.0统计学软件实行分析,对相关数据使用t进行检验,医治前后使用X2进行检验,存在显著性差异,并具有统计学意义(P<0.05)。2结果全部的植体历经了时限一年的研究与观察,并没有发生临床脱落以及病人对此种效果不满意的情况。并且在每个时间点中实验组与对照组间的牙周软组织经过t进行检验,没有出现统计学差异(p<0.05),以复查三次的的复查结果为依据探究周围软组织的变化程度,研究后发现,治疗组t1,t2,t3分别为1.99mm,2.11mm,2.30mm,对照组的结果为t1,t2,t3分别为1.99mm,2.11mm,2.30mm,经统计学分析后发现龈的乳头的治疗指数不具有统计学意义。3讨论种植义齿修复是现阶段口腔治疗中应用最广泛、并且影响意义较大的部分,其是用于缺牙修复的最佳治疗方法。在上个世纪末期,引导骨再生技术的使用在口腔临床治疗中获得了较大的突破,并且已经作为种植病人牙槽局部骨缺损再生的重要手段。引导骨再生技术的根本理念是经过屏障设立出一个可以隔离的空间,让骨组织在不受打扰以及受保护的状态下自动愈合。因为骨组织是一个生长速度比较迟缓的部位,所以成纤维细胞以及上皮细胞能够对缺损的空间造成损害,使缺损空间变成软组织。因此,引导骨再生技术就是为了防止其他细胞增生繁殖,使源自于骨组织部分的细胞迅速繁殖并长入所占据的区域中。前牙区域的牙种植术是因居于较为敏感的部分,所以在修复过程中具备较强的专业性。在前牙区域部位,种植位点经常出现不同状态的骨量不足现象,因此在临床中通常会出现唇侧骨板废用性渐进吸收等情况。引导骨再生技术是现阶段种植体植入后水平向骨组织损伤的有效途径。在临床治疗过程中采用量化指标对种植体周的软组织进行评测是存在一定困难程度的。在这里选取了种植体周探诊深度等对其进行评测,这是一种比较客观性的方式。据相关文献报道,种植体周软组织结构与天然牙齿的深度之间是存在不同之处的,原因则是这两项的生物学宽度不一样。并且,不同程度的边缘骨也对种植体周软组织结构有着不同程度的影响。通过对患者应用引导骨再生术来发现可以影响在美学区周围的种植体的周围相关的软组织损害。经过1年的临床观察,在进行多项数据分析之后了解到正常种植与引导骨再生技术种植修复牙部软组织并无明显性区别,则可初步表明引导骨再生术对其不产生影响。深入的证实还应经过长时间的临床观察与随访,这是接下来要进行的工作。参考文献[1] 陈波,邱立新,胡秀莲.上颌前牙区单牙种植钛膜引导成骨的美学效果观察[J].现代口腔医学杂志,2011,(03):165-170.[2] 黎卫星;姜玲;张晓燕;张迪;金光春;;种植体周围软组织状态对种植义齿修复的影响[J];医学研究生学报;2011,(04):258-259[3] 金琼;王晓敏;王晓飞;李旭东;麻健丰;;胶原-羟磷灰石复合膜引导骨组织再生的动物实验研究[J];华西口腔医学杂志;2011,(01):82-89[4] 黎卫星;姜玲;张晓燕;张迪;金光春;;种植体周围软组织状态对种植义齿修复的影响[J];医学研究生学报;2011,(04):179-180[5] NynkeT,GerryM,ArjanV.Dentalimplanttreatmentfortwoadjacentmissingteethinthemasillaryaestheticzone:acomprarativepilotstudyandtestofprinciple[J].ClinicalOralImplantsResearch,2011,(22):207-213.
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