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    赤霉素固态发酵培养基的研究

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    广
    ３８　
    东化工　２０１８年第８期　第４５卷总第３７０期　
    ＷＷＷ．ｇｄｃｈｅｍ．ｃｏｍ　
    赤霉素固态发酵培养基的研究　
    刘风莉　，白净·，－，李攀·，一，　方书起　，一，常春　，一，韩秀丽　，２　
    （１．郑州大学化工与能源学院，河南郑州Ｉ　４５０００１：２．　生物质炼制技术与装备河南省工程实验室，河南郑州Ｉ　４５０００１）　
    【摘要］赤霉素是一种重要的植物生长调节剂，当前市场上的产品主要由微生物发酵而来。在发酵过程中，培养基的组成也是近年来研究的　
    热门话题。本文将汽爆处理后的农作物秸秆作为原料．经纤维索酶水解，然后加入培养基中进行固态发酵。结果表明将１　ｇ汽爆秸秆酶解后，作　为培养基组成的一部分进行发酵．发酵周期为１６８　ｈ时，可得到的赤霉素最大产量为７８９．１４　ｍｇ／ｋｇ干基　
    【关键词］赤霉素：固态发酵：酶解　［中图分类号】Ｔ＿Ｑ　［文献标识码］Ａ　［文章编号】１００７一】８６５（２０１８）Ｏ８－００３８—０１　
    Ｒｅｓｅａｒｃｈ　ｏｎ　Ｓｏｌｉｄ—ｓｔａｔｅ　Ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ　Ｍｅｄｉｕｍ　ｆｏｒ　Ｇｉｂｂｅｒｅｌｌｉｎ　
    Ｌｉｕ　Ｆｅｎｇｌｉ　，Ｂａｉ　Ｊｉｎｇ　一，Ｌｉ　Ｐａｎ‘一，Ｆａｎｇ　Ｓｈｕｑｉ　一，Ｃｈａｎｇ　Ｃｈｕｎ’一，Ｈａｎ　Ｘｉｕｌｉ　’　
    ｛１．Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ　ａｎｄ　Ｅｎｅｒｇｙ，Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ　４５０００　１；　
    ２．Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｏｆ　Ｈｅｎａｎ　Ｐｒｏｖｉｎｃｅ　ｆｏｒ　Ｂｉｏ．，Ｒｅｆｉｎｅｒｙ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　ａｎｄ　Ｅｑｕｉｐｍｅｎｔ，Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ　４５０００　１，Ｃｈｉｎａ）　
    Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｇｉｂｂｅｒｅｌｌｉｎ　ｉｓ　ａｎ　ｉｍｐｏｒｔａｎｔ　ｐｌａｎｔ　ｇｒｏｗｔｈ　ｒｅｇｕｌａｔｏｒ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｐｒｏｄｕｃｔ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｃｕｒｒｅｎｔ　ｍａｒｋｅｔ　ｉｓ　ｆｅｒｍｅｎｔｅｄ　ｂｙ　ｍｉｃｒｏｂｅｓ．Ｉｎ　ｔｈｅ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｏｆ　ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ，ｔｈｅ　ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｍｅｄｉｕｍ　ｉｓ　ａｌｓｏ　ａ　ｈｏｔ　ｔｏｐｉｃ　ｉｎ　ｒｅｃｅｎｔ　ｙｅａｒｓ．Ｉｎ　ｔｈｉｓ　ｐａｐｅｒ，ｔｈｅ　ｃｏｒｎ　ｓｔａｌｋｓ　ａｆｔｅｒ　ｓｔｅａｍ　ｅｘｐｌｏｓｉｏｎ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｗｅｒｅ　ｔｒｅａｔｅｄ　ｂｙ　ｃｅｌｌｕｌａｓｅｓ．Ｔｈｅ　ｐｒｏｄｕｃｔｓ　ｏｆ　ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ　ｗｅｒｅ　ａｄｄｅｄ　ｉｎｔｏ　ｔｈｅ　ｃｕｌｕｒｔｅ　ｍｅｄｉｕｍ　ｆｏｒ　ｓｏｌｉｄ—ｓｔａｔｅ　ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｍａｘｉｍｕｍ　ｇｉｂｂｅｒｅｌｌｉｎ　ｙｉｅｌｄ　ｗａｓ　７８９．１　４　ｍｇ／ｋｇ　ｄｒｙ　ｂａｓｉｓ　ｗｈｅｎ　１　ｇ　ｃｏｒｎ　ｓｔａｌｋｓ　ａｆｔｅｒ　ｓｔｅａｍ　ｅｘｐｌｏｓｉｏｎ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｗｅｒｅ　ｅｎｚｙｍａｔｉｃａｌｌｙ　ｔｒｅａｔｅｄ　ａｓ　ａ　ｐａｒｔ　ｏｆ　ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ　ｍｅｄｉｕｍ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ　ｐｅｒｉｏｄ　ｗａｓ　１　６８　ｈｏｕｒｓ．　
    Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｇｉｂｂｅｒｅｌｌｉｎ；ｓｏｌｉｄ　ｓｔａｔｅ　ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ：ｅｎｚｙｍｏｌｙｓｉｓ　
    赤霉素俗称几二零，是五大植物激素之一。赤霉素广泛应用　
    于农业、苗圃、园艺、栽培技术、茶园等在高等植物的生长发育　过程中起着重要的调控作用…。１９１２，Ｓａｗａｄａ指出由于真菌感染　而导致的稻苗的疯长原因是由于真菌分泌的一种物质【　。在１９３４　年，Ｔｅｉｊｉｒｏ　Ｙａｂｕｔａ首次从病原体的发酵滤液中得到引起恶苗病的　有效成分。结果表明，该组分在任何浓度下都可以使水稻幼苗徒　长，并在１９３５正式命名为赤霉素【　。到２００３年为止，已经鉴定　出至少１２６种赤霉素，主要来自植物和微生物【　］。赤霉素通常以　其发现的先后顺序依次命名为ＧＡ１……ＧＡｎ。　
    当前最主要的发酵方法为液体深层发酵　然而，随着经济的　发展，固态发酵技术越来越受到重视。固态发酵具有以下优点：　（１）投资少，工艺操作简单。（２）产品浓度高，提取工艺简单，提取　更全面。（３）发酵原料一般是农产品，容易获得。（４）固体培养基易　于根据需要进行调整。　
    中国作为农业大国，秸秆资源非常丰富，年产量超过７亿吨。　但在我国秸秆并没有被充分利用，大部分被闲置浪费，或者就地　焚烧，不仅浪费资源也污染环境。本文将玉米秸秆用蒸汽爆破，　然后用纤维酶酶解．酶解后加入培养基中作为培养基的一部分，　进行赤霉素固态发酵　本文把赤霉素发酵和玉米秸秆结合起来，　可以既使资源得到重复利用，减少污染，又可以增加效益。　
    解条件为５０℃，２００　ｒ／ａｉｒｎ酶解４８　ｈ。　
    分别在酶解后的锥形瓶中加入ｌ０　ｇ，９．５　ｇ，９　ｇ，８　ｇ，７　ｇ，６　
    ｇ的麸皮。再在６个锥形瓶中各加入ＭｇＳＯ４。７Ｈ２０　０．０１　ｇ，ＫＨ２ＰＯ４　
    ０．０１　ｇ搅拌均匀，以１０％（ｖ／ｗ）的种子培养液接入固态发酵培养基　中，放入培养箱进行发酵。　１．２－３赤霉素的提取方法【　
    将固体发酵料，磨碎混匀，用盐酸调配成ｐＨ为卜３的酸化　水处理两个小时，过滤，取５　ｍＬ滤液加入ｌ０　ｍＬ乙酸乙酯进行　萃取，取上层有机相，真空浓缩获得产品。　１．２．４分析方法　
    赤霉素的检测：分光光度计法【　］　
    取溶于体积分数为７Ｏ％的乙醇中的赤霉素溶液Ｏ．５　ｍＬ加入　４．５ｍＬ　９８％硫酸，混匀后置冰浴中ｌ０ｍｉｎ，再置２８℃水浴中ｌ　ｈ。　取出置室温中ｌ５　ｍｉｎ。以７０％乙醇为参比，在分光光度计上测吸　光度。　
    ２结果与讨论　
    ２．１汽爆秸秆量对赤霉素产量的影响　
    ｌ试验材料和方法　
    １．１试验菌株　
    串珠镰刀菌Ｆｕｓａｒｉｕｍ　ｍｏｎｉｌｉｆｏｒｍｅ菌种编号为ＣＩＣＣ　２４９０，　购买自中国工业微生物菌种保藏管理中心。经驯化可以在秸秆培　养基上很好的生长并命名为ＦｍＳ．１。　ｌＩ２培养基　１．２．１培养基　
    斜面培养基（　Ｌ）土豆２００，葡萄糖２０，ＭｇＳＯ４＂７Ｈ２０　ｌ，　ＫＨ２ＰＯ４　ｌ，琼脂２０，ｐＨ自然。　
    种子培养基（ｇ／Ｌ）Ｃ６Ｈｔ２０６　ｌ２０．Ｉ１，（ＮＨ４）２ＳＯ４　４．４０，　
    ＭｇＳ０４‘７Ｈ２０　４．１１．ＫＨ２Ｐ０４　２．２７，ｐＨ＝４．５。　
    基础固态发酵培养基（１０　ｇ／２５０　ｍＬ三角瓶）：麸皮１０　ｇ，　
    ＭｇＳＯ４＂７Ｈ１００．０ｌ　ｇ，ＫＨ２ＰＯ４　０．０ｌ　ｇ，Ｈ２Ｏ　ｌ０ｍＬ，ｐＨ自然。　
    汽爆秸秆量．，ｇ　
    ｌ＿２．２试验方法　
    将４℃下保存的菌株经活化后，接种于ＰＤＡ斜面培养基上　２８℃培养３　ｄ，然后将斜面培养基制成菌悬液接入种子培养基中，　在摇床上２８℃，２００　ｒ／ｍｉｎ，培养３６　ｈ后，以１０％（ｖ／ｗ）的种子培　养液接入固态发酵培养基中，３Ｏ℃培养。　
    将Ｊ０ｍＬ柠檬酸缓冲液分别加入装有０　ｇ，０．５　ｇ。ｌ　ｇ，２　ｇ，　３　ｇ，４　ｇ的汽爆秸秆的锥形瓶中，然后分别加入０　ｍＬ，０．０２　ｍＬ，　０．０４　ｍＬ，Ｏ．０８　ｍＬ，Ｏ．１３　ｍＬ，０．１７　ｍＬ的纤维素酶进行水解，酶　
    文稿日期］２０１８—０３—１５　
    ［基金项目Ｊ郑州市科学技术局（Ｎ０：１４１ＰＰＴＧＧ４０９）　
    图ｌ汽爆秸秆量对赤霉素产量的影响　
    Ｆｉｇ．１　Ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ａｍｏｕｎｔ　ｏｆ　ｓｔｅａｍ　ｅｘｐｌｏｓｉｏｎ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｇｉｂｂｅｒｅｌｌｉｎ　
    ｙｉｅｌｄ　
    从图中可以看出，赤霉素的产量随着汽爆秸秆的质量的增加，　
    先增加后减少，当汽爆秸秆的量为ｌ　ｇ时，赤霉素的产量最大为　７８９．１４　ｍｇ／ｋｇ干基，当汽爆秸秆的量为４　ｇ时，赤霉素的产量最小　
    （下转第ｌ９页）　
    【作者简介】刘风莉（１９９２一），女，硕士研究生ｔ主要研究微生物发酵。　

    ２０１８年第８期　广东化工　
    １９　
    第４５卷总第３７０期　
    ＷＷＷ．ｇｄｃｈｅｍ．ｃｏｍ　
    合材料的相关产业和部ｆ］提供了性能优良的新型材料，也为盐泥　
    的高附加值利用开辟了新途径。　
    ０磊　
    三　
    参考文献　
    ｆ¨中国产业研究院．２０１８—２０２３年中国烧碱行业市场需求及前景分析　告．ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ａｓｋｃｉ．ｃｏｍ／ｎｅｗｓ／ｃｈａｎｙｅ／２０１８０ｌ２４／ｌ６【ｌ３７１Ｉ６７８３．ｓｈｔｍ１．　［２】楼紫阳，宋立言，赵由才，等．中国化工废渣污染现状及资源化途径【Ｊ】＿化　工进展，２００６，２５（９）９８８．９９４．　
    ｆ３ｌＭＥＬＩＡＮ　ＭＡＲＴＥＬ　Ｎ，　ＳＡＤＨ　『ＡＮｌ　ＪＪ，　ＯＶｌＤＩＯ　ＰＥＲＥＺ　ＢＡＥＺ　
    Ｓ．ＳＡＬＩＮＥ　ｗａｓｔｅ　ｄｉｓｐｏｓａｌ　ｒｅｕｓｅ　ｆｏｒ　ｄｅｓａｌｉｎａｔｉｏｎ　ｐｌａｎｔｓ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　Ｃｈｌｏｒ－Ａｋａｌｉ　
    ｉｎｄｕｓｔｒｙ［Ｊ１．Ｄｅｓａｌｉｎａｔｉｏｎ，２０１　１，２８１：３５—４１．　
    ２０（ｄｅｇｒｅｅ）　
    ［４】杨娜．硫酸钙晶须的水热法制备及稳定化研究【Ｄ］．湖南大学，材料科　学与工程学院，２０ｌ４年．　
    ［５］魏钟晴，马培华．溶液系统中的晶须生长机理［Ｊ］．盐湖研究，ｌ９９５，３（４）：　
    ５７．６４．　
    图５产物的ＸＲＤ谱图　
    Ｆｉｇ．５　ＸＲＤ　ＰａＵｅｍ　ｏｆ　Ｐｒｏｄｕｃｔ　
    ３结论　
    （１）新疆天业氯碱厂盐泥主要含有钙镁盐，Ｍｇ２　存在可促进硫　
    酸钙晶须沿轴向生长，实验表明利用水解法在ＰＨ＝６ｏ＇，７时，Ｆｅ　、　Ａｌ　等杂质的去除率可达到９０．０％左右，Ｃａ２　、Ｍｇ２　损失率为２．５％　
    左右。　
    【６］吕鹏飞，费德君，党亚固．磷石膏制备硫酸钙品须及晶须造纸应用研究　
    进展『Ｊ１．化工进展，２０１３，３２（４）：８４２—８９０．　
    ［７］张华伟，陈继涛．梁鹏，等．硫酸钙晶须制备机理及技术研究进展［Ｊ］．材　料导报，２０１ｌ，２５（６）：４６—５０．　［８】宫海燕，李彩虹，王佩佩，等．杂质对溶液结晶过程影响的研究进展【Ｊ１．化　学与生物程，２０ｌ０ｆ３１：９．１２．　［９］袁建军，方琪，刘智恩．晶须的研究进展Ⅲ．材料科学与工程，Ｉ９９６，　
    １４（４）：　１－７．　
    （２）在氯化钙净化液和硫酸钠体系中，对不同晶型助长剂研　
    究，发现ＣＴＡＢ可促进高长径比的硫酸钙晶须生成，生成半水硫　酸钙晶须的最佳工艺为：净化液ＣａＣＩ２浓度为Ｏ．２　ｍｏｌ／Ｌ与等浓度　等体积硫酸钠反应，９５％乙醇掺量ｖ　／ｖ　＝ｌ：４，ＣＴＡＢ加入　量为理论生成值的０．５％，超声、陈化各ｌ小时制得长径约　ｌ００￣０２２０　ｍ，直径约５　ｌ０　ｌａｍ，表面光滑性较好的ＣａＳＯ４．０．５Ｈ２Ｏ　晶须，晶须生成率可达到９０．１％。　
    （３）采用超声波加快了晶核的形成，缩短了半水硫酸钙晶须的　结晶和单晶生长的时间，并在常温下降低了对设备的要求，易于　实现工业化。　
    （４）以氯碱盐泥为原料制备硫酸钙晶须，极大提高氯碱盐泥的　利用率和价值，解决企业氯碱盐泥的环境污染问题，既为生产复　
    ［１０】罗康碧，李沪萍．水热法制各半水硫酸钙晶须工艺探讨『Ｊ］．中国有色　
    冶金．２Ｏ１０（１）：５７　６Ｏ．　
    【ｌ１］李向清，陈强，张林鄂，等．微米级硫酸钙晶须的制备『Ｊ］．应用化学，　
    ２００７，２４（８）：９４５—９４８．　
    ［１２】曹海星，刘维泰，曹海田．硫酸钙纤维ｆＪ】．现代化工，１９８８。８：５８　５９．　
    『１３１Ｍａｈｍｏｕｄ　Ｍ　Ｈ　Ｈ，Ｒａｓｈａｄ　Ｍ　Ｍ，Ｉｂｒａｈｉｍ　ｌ　Ａ，ｅｔ　ａ１．Ｃｒｙｓｔａｌ　ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ　
    ｏｆ　ｃａｌｃｉｕｍ　ｓｕｌｆａｔｅｄｉｈ）　ｄｒａｔｅ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｐｒｅｓｅｎｃｅ　ｏｆ　ｓｏｍｅ　ｓｕｒｆａｃｅ—ａｃｔｉｖｅ　ａｇｅｎｔｓ　
    『Ｊ１．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆＣｏｌｌｏｉｄ　ａｎｄ　ｌｎｔｅｒｆａｃｅ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　２７０（２００４）９９－１０５．　
    （本文文献格式：樊新花，但建明，张燕，等．利用氯碱盐泥超声　制备硫酸钙晶须［Ｊ］．广东化工，２０１８，４５（８）：１６－１９）　
    （上接第３８页）　
    为３０７．６１　ｍｇ＆ｇ干基。由于汽爆秸秆被酶解为葡萄糖。当汽爆秸　
    秆量大于ｌ　ｇ时，酶解出来的葡萄糖过多，而产生了抑制作用，　当汽爆秸秆量小于ｌ　ｇ时，酶解出的葡萄糖过少不足以提供串珠　镰孢菌的生长和生产赤霉素。所以本文采用１　ｇ酶解后的汽爆秸　秆作为发酵培养基的一部分。　２．２赤霉素的发酵曲线　
    到１６８　ｈ以后，培养基中的营养物质己被串珠镰孢菌消耗完，菌　
    丝破裂甚至熔解。　
    ３结论　
    将Ｉ　ｇ汽爆秸秆用纤维素酶酶解后作为培养基的一部分进行　赤霉素发酵，发酵周期为ｌ６８　ｈ时得到赤霉素产量最大。赤霉素　的产量在０－５０　ｈ时增长较慢，在５０～１５０　ｈ增长较快，１　５０　ｈ后基　本保持恒定不变，赤霉素产量最大为７８９．１４　ｍｇ／ｋｇ干基，本试验　为固态发酵生产赤霉素提供了一条新的途径，同时也考虑了秸秆　的应用，减少了资源浪费。　
    潲　
    参考文献　
    ［Ｉ］Ｍａｒｔｉｎ　Ｃ　Ｇ．Ｔｈｅ　ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ａｎｄ　ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ　ｏｆｇｉｂｂｅｒｅｌｌｉｎｓ，Ｉｎ：Ｃｒｏｚｉｅｒ　
    Ａ（ｅｄ）Ｇｉｂｂｅｒｅｌｌｉｎｓ．Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ：Ｐｒａｅｇｅｒ　Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，ｌ９８３：３９５．４ｌ１．　
    ＼　
    普　
    ■｛　
    ｛Ｌ　髅　雌　憔　
    【２］Ｓａｗａｄａ　Ｋ．Ｄｉｓｅａｓｅｓ　ｏｆａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　ｐｒｏｄｕｃｔｓ　ｉｎ　Ｊａｐａｎ．Ｊ　Ｆｏｒｍ　Ａｇｒｉｃ　Ｒｅｖ，　
    ｌ９Ｉ２，６３：ｌＯ。１６．　
    ［３］Ｙａｂｕｔａ　Ｔ．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ｏｆｔｈｅ“ｂａｋａｎａｅ”￣ｎｇｕｓ　ｏｆｒｉｃｅ．Ｊ　Ａｇｒｉｃ　Ｈｏｎｉｃ，　
    １９３５，ｌ０：Ｉ７—２２．　
    ［４］Ｔｕｄｚｙｎｓｋｉ　Ｂ．Ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｏｆ　ｇｉｂｂｅｒｅｌｌｉｎｓ　ｉｎ　Ｇｉｂｂｅｒｅｌｌａ　ｆｕｊｉｋｕｒｏｉ：　
    ｂｉｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ａｓｐｅｃｔｓ．Ａｐｐｌ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ，ｌ９９９．５２：２９８．３ｌ０．　
    培养时（￣ｌ／ｈ　
    『５］Ｓｈｕｋｌａ　Ｒ，Ｓｒｉｖａｓｔａｖａ　Ａ　Ｋ，Ｃｈａｎｄ　Ｓ．Ｂｉｏｐｒｏｃｅｓｓ　ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ　ａｎｄ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　
    ｐｒｏｃｅｓｓｅｓ　ｉｎ　ｇｉｂｂｅｒｅｌｌｉｃ　ａｃｉｄ　ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ．Ｊ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ　Ｂｉｏｐｒｏｃ　Ｅｎｇｉｎ，２００３，　８：２６９—２７８．　
    图２不同培养时间赤霉素的产量　
    Ｆｉｇ．２　Ｔｈｅ　ｇｉｂｂｅｒｅｌｌｉｎ　ｙｉｅｌｄ　ｄｕｒｉｎｇ　ｓｏｌｉｄ　ｓｕｂｓｔｒａｔｅ　ｃｕｌｔｉｖａｔｉｏｎ　ａｔ　
    ｄｉｆｒｅｒｅｎｔ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｔｉｍｅ　
    结果表明，随着培养时间的增加，赤霉素产量先上升后急剧　
    上升，最终趋于平缓，如上图所示。赤霉素最大产量是在１６８　ｈ　时达到最大，产量为７８９．１４　ｍｇ／ｋｇ干基。之后随着培养时间的增　加赤霉素产量基本保持不变甚至有所减少。培养时间为Ｏ～５０　ｈ之　间菌丝主要用于生长，所以产赤霉素量较少。当培养时间为　５０－１５０　ｈ之间主要为串珠镰孢菌产赤霉素的阶段。当发酵时间达　
    ［６］谭业平．赤霉素固体发酵提取新工艺【Ｐ】．中国：ＣＮ１０４８０６３，１９９０一ｌ２．２６．　
    ［７］肖志壮，杨加华，邢红宏，等．赤霉素的分光光度法测定［Ｊ］．烟台大学　学报（自然科学与工程版），１９９７（０４）：３３　３６．　
    （本文文献格式：刘风莉，白净，　李攀，等．赤霉素固态发酵培养　基的研究［Ｊ］．广东化工，２０１８，　４５（８）：３８）　


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