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牡丹组织培养中不同因素对组培苗生根的影响
作者：刘改秀李敏赵国栋张少达王丽娜来源：《河南农业·综合版》2014年第3期
洛阳国家牡丹园刘改秀李敏赵国栋张少达王丽娜
组织培养技术是植物快速繁殖的最有效手段之一。牡丹作为我国传统名花及重要出口花卉，产业化生产成为其今后发展的主要方向。应用植物组织培养技术对牡丹进行快速繁殖是促进牡丹产业化生产的重要技术。虽然利用组织培养技术来规模化生产牡丹种苗在理论上是可行的，但目前还没有真正应用于生产。原因主要是：牡丹试管苗生根率低、生根质量不高、移栽难以成活等。因此，在牡丹组织培养过程中，如何提高生根率，改善生根质量，促进移栽成活成为当前需要解决的首要问题。笔者以“洛阳红”为代表，对影响牡丹组培苗生根的不同因素进行探讨，以期为牡丹产业化生产奠定基础。
一、材料与方法
（一）供试材料
2012年2月，自洛阳国家牡丹品种圃采集“洛阳红”牡丹未萌动的鳞芽，经试管培养，获得无菌的“洛阳红”组培苗进行试验。试验于2012—2013年在国家牡丹园中心实验室进行。
（二）试验方法
1、基本培养基对“洛阳红”组培苗生根的影响。采用两种基本培养基MS、1/2MS，附加1.0mg/L的IBA与0.5mg/L的IAA，pH值调至6.2，接种“洛阳红”牡丹试管苗，完全随机设计，每处理30瓶，每瓶3株，要求苗大小相近。
2、生长素浓度配比对“洛阳红”组培苗生根的影响。以1/2MS培养基为基本培养基，附加不同浓度的IBA、IAA及NAA组合，接种生长一致的“洛阳红”牡丹组培苗（见下表）。
3、组培苗状态对“洛阳红”试管苗生根的影响。分别将“洛阳红”主芽（这里指未经继代培养而由鳞芽直接诱导生长的试管苗）及不定芽（这里指经继代培养及复壮后的丛生芽）分别接种到1/2MS+IBA（1.0mg/L）+IAA（0.5mg/L）的生根培养基中，40d后对比二者生根情况。
4、防褐剂种类对“洛阳红”组培苗生根的影响。以1/2MS+IBA（1.0mg/L） +IAA （0.5mg/L）为生根培养基，分别以PVP（0.5g/L）、AC（0.5g/L）作为防褐剂，将“洛阳红”试管苗分别接种于两种培养基中，对比两种处理条件下组培苗的生根情况。
5、生根培养前继代培养基中激素浓度对“洛阳红”组培苗生根的影响。将两种不同的继代培养基【（MS+BA（1.0mg/L）+KT（0.5mg/L）+GA（0.3mg/L）】、【MS+BA（0.5mg/L）+KT（0.25mg/L）+GA（0.15mg/L）】中生长一致的“洛阳红”组培苗分别接种到1/2MS+IBA（1.0mg/L）+IAA（0.5mg/L）+PVP（0.5g/L）生根培养基中，40d后分别统计生根率。
二、结果与分析
（一）基本培养基对“洛阳红”组培苗生根的影响
将“洛阳红”牡丹试管苗分别接种在附加相同激素的1/2MS、MS基本培养基中，40d后，1/2MS基本培养基上生长的试管苗生根率为57.8%，MS基本培养基上生长的试管苗生根率为25.6%。说明1/2MS培养基适宜作为生根培养的基本培养基。
（二）生长素配比对“洛阳红”组培苗生根的影响
以1/2MS培养基作为基本培养基，在16种不同生长素配比水平下对“洛阳红”牡丹组培苗进行生根培养。结果表明，生长素总浓度低于1mg/L时，生根率极低（低于10%）；生长素种类对“洛阳红”组培苗生根的影响不明显；在一定生长素浓度范围（1~5mg/L）内，生根率大小与生长素浓度并不成比例；16种激素配比中，最适宜的生根激素配比为IBA（1.0mg/L）+IAA（0.5mg/L）。
（三）组培苗状态对“洛阳红”组培苗生根的影响
在相同的生根培养基中，分别对“洛阳红”主芽和不定芽进行生根培养，结果不定芽的生根率（51%）远远高于主芽的生根率（19%）。主芽生根率低于不定芽，原因可能是主芽比较成熟甚至老化，不容易被诱导分化，而丛生芽比较幼嫩，内部生理活动活跃，容易诱导生根。
（四）防褐剂种类对“洛阳红”组培苗生根的影响
牡丹试管苗褐化严重，在1/2MS+IBA（1.0mg/L）+IAA（0.5mg/L）生根培养基中分别附加防褐剂PVP（0.5g/L）和AC（0.5g/L），结果添加PVP的生根培养基中试管苗生根率为40.5%，而添加AC的生根培养基中试管苗生根率为20.8%，说明AC对牡丹试管苗的生根有一定的抑制作用，可能是因为AC在吸附有害物质的同时，也吸附了促进生根的生长激素。所以，生