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扶芳藤醇提液对小鼠凝血四项的影响
蒋力群;霍宇;杨捷
【摘要】目的：研究中药扶芳藤的凝血作用。方法实验动物随机分为6组，即空白对照组、阳性对照组、扶芳藤醇提液高、中、低剂量组，测定扶芳藤醇提液对对小鼠凝血酶时间（TT）、凝血酶原时间（PT），活化部分凝血活酶时间（APTT）和纤维蛋白原（FIB）的影响。结果扶芳藤醇提液能明显缩短小鼠TT、PT、APTT，增加FIB含量。结论扶芳藤醇提液具有显著的凝血作用。【期刊名称】《中国医药指南》【年(卷,期】2016(014010【总页数】2页(P41-41,42
【关键词】扶芳藤;凝血时间;凝血四项【作者】蒋力群;霍宇;杨捷
【作者单位】中国人民解放军第303医院药剂科，广西南宁530000;广西中医药大学赛恩斯新医药学院，广西南宁530222;中国人民解放军第303医院药剂科，广西南宁530000【正文语种】中文【中图分类】R284
扶芳藤（Enonymusfortunei（Ture.）Hand-Mazz）系卫矛科卫矛属植物，属民间草药。《中药大辞典》记载“扶芳藤治腰肌劳损，关节酸痛、补肾强筋，安胎，止血消癖”［1-2］。本实验在前期研究工作基础上以云南白药为阳性对照药物，
验证中药扶芳藤的凝血作用，探讨其作用机制，为中药扶芳藤下一步开发利用应用提供科学依据。1.1材料
1.1.1药物及试剂：扶芳藤原药材由广西中医学院制药厂科研所提供，经广西中医药大学赛恩斯新医药学院苑敏教授鉴定，药材用12倍量60%乙醇，提取2次，每次1h，3.8g生药/g；实验时以蒸馏水配成所需浓度；云南白药（批号：20080629），云南白药集团股份有限公司；109mmol/L枸橼酸钠溶液（批号：20060323），广东达濠精细化学品公司；凝血酶原时间（PT）试剂盒（批号：105090），北京莱博生物实验材料研究所；活化部分凝血活酶时间（APTT）试剂盒（批号：111021），北京莱博生物实验材料研究所；凝血酶时间（TT）试剂盒（批号：111027），北京莱博生物实验材料研究所；纤维蛋白原（FIB）试剂盒（批号：1110131），北京莱博生物实验材料研究所。
1.1.2实验动物：昆明种小鼠，体质量18～22g，雌雄兼用，购自广西医科大学实验中心，合格证号：SCXK桂2009-0002，标准饲料喂养，自由摄食，自由饮水。医学实验动物环境设施合格证号（桂）医动字第12006号，使用许可证号SYXK（桂）2003-0001。
1.1.3实验仪器：SysnECA-150型全自动血凝仪，日本东亚医用电子仪器有限公司；TU-1901型紫外可见分光光度计，北京普析通用仪器有限责任公司。1.2方法［3］：取健康昆明种小鼠60只，体质量（20±2）g，雌雄兼用，随机分成5组，12只/组。即空白对照组（生理盐水，NS）、阳性药对照组、扶芳藤醇提液高、中、低三个剂量组。空白对照组给予等容积NS，阳性对照组给予云南白药1g/kg，用药组高剂量组（18g生药/kg），中剂量组（9g生药/kg），低剂量组（4.5g生药/kg），灌胃给药（ig），给药容量为20mL/kg。每天给1次，连续7d。末次给药后1h，拔眼球取血1.5mL，缓慢注入含0.5mL109
mmol/L枸橼酸纳溶液的塑料试管中，充分混匀。以3000rpm离心15min去除血小板，分离血浆，采用SysnECA-150型全自动血凝仪，测定凝血四项：凝血酶原时间（PT）、激活部分凝血酶原时间（APTT）、凝血酶时间（TT）、纤维蛋白原含量（FIB）。
1.3统计学方法：采用统计学软件SPSS17.0进行统计学处理，数据结果以均数±标准差表示，组间比较采用方差分析，以P＜0.05具有统计学意义。
云南白药与扶芳藤醇提液高、中、低剂量组均能明显缩短实验小鼠PT、APTT和TT，提高血浆FIB，与空白对照组比较有显著性差异（P＜0.05或P＜0.01）。结果见表1。
止血过程是复杂的生理功能，包括血管收缩、血小板聚集和血液凝固三个因素。如外伤出血，则见局部血管收缩，血小板在血管破裂处凝集，破裂并释放出血管收缩物质及“凝血因子”，而组织液及血浆中的一些凝血因子（因子Ⅴ，Ⅶ，Ⅷ，Ⅸ，Ⅺ，Ⅻ等）也受到激活而参与血凝过程，于是血块形成，出血停止［4］。凝血酶原时间（PT）测定，属于检测外源性凝血途径的筛选性试验，主要用于筛选检测外源凝血系统因子Ⅶ、Ⅴ、Ⅹ和相关因子的抑制物的试验［5-7］；活化部分凝血活酶时间（APTT）测定，反映Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ等内源凝血途径因子的活性，是内源性凝血系统较敏感和常用的筛选方法［8］；纤维蛋白原（FIB）由α、β、γ三对不同多肽链所组成，多肽链间以二硫键相连。在凝血酶作用下，α链与β链分别释放出A肽与B肽，生成纤维蛋白单体。在此过程中，由于释放了酸性多肽，负电性降低，单体易于聚合成纤维蛋白多聚体。进一步在Ca2+与活化的Ⅷ因子作用下，单体之间以共价键相连，则变成稳定的不溶性纤维蛋白凝块，完成凝血过程［9］；凝血酶（TT）时间测定是检测凝血、抗凝及纤维蛋白溶解系统功能的一个关键试验［10］。
本实验结果显示，扶芳藤醇提液各剂量组均可不同程度的缩短APPT及PT时间，
表现为同时影响小鼠的内源性和外源性凝血系统起而到促凝作用；本品使凝血时间时间缩短FIB含量增高，提示本品的止血作用可能与影响小鼠纤维蛋白溶解系统有关。扶芳藤药用历史悠久，历代本草对它的功效均有论述。本实验通过初步的凝血研究，扶芳藤醇提液能明显缩短小鼠血浆TT、PT、APTT，增加FIB含量，有较为显著的凝血作用，但其成分复杂，要明确其凝血作用具体机制，尚待进一步深入研究。

【相关文献】
［1］国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本草［M］.上海:上海科学技术出版社，1999:827.［2］江苏新医学院.中药大辞典［M］.上海:上海科学技术出版社出版，1986:108.［3］徐淑云，卞如濂，陈修.药理实验方法学［M］.3版.北京:人民卫生出版社，2002:1271.［4］姚泰.生理学［M］.5版.北京:人民卫生出版社，2002:63.［5］SmytheMA，KoberberJM，NowakSN，etal.Correlationbetweenactivatedclottingtimeandactivatedpartialthromboplastintimes［J］.AnnPharmacother，2002，36（1）:7.［6］费鲜明，陈艳，吴万飞，等.仙鹤草水体物体外对血小板聚集、凝血功能及血液流变学的影响［J］.中国临床药理学与治疗学，2013